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筛选稳定细胞株的这两种方法你学会了没?
点击次数:23 发布时间:2020-02-12
   稳定细胞株适用于各种研究应用, 如重组蛋白和抗体生产、检测分析、基因编辑、功能性研究等等。义翘神州多年从事蛋白表达研究,具有大量细胞株开发经验,能够有效提高细胞株的生产能力,改善实验结果。我们整合所有的实验步骤,提供从基因序列到稳定株交付的一站式服务。
  筛选稳定细胞株的两种方法:
  1、转染质粒后,单克隆方法筛选稳定细胞系
  对大多数细胞转染效率较低。对于基因过表达,如果转染效率达到40%,基因过表达尚可。但是对于基因干扰实验,对转染效率要求远远高于基因过表达,通常质粒转染无法满足。
  另外,质粒游离于细胞质中,很快降解,无法满足较长时间的检测项目;质粒转染整合几率极低,细胞株构建耗时耗力,且得率很低,往往需要挑取单克隆株。
  2、病毒感染筛选细胞株
  病毒感染方法较质粒转染筛选单克隆方法更方便和高效,是目前主流的稳定细胞系筛选方法。用慢病毒制备稳转细胞株,由于其高效整合、高效转录、高效表达、宿主范围广,感染效率高,且与细胞染色体整合而不发生基因重排,是制备细胞株的理想载体。
  稳定细胞株应用:
  稳定持续地生产目的蛋白
  构建符合法规要求的无血清培养细胞株
  表达具有活性的大分子量多聚体蛋白,此类蛋白通常需要复杂的翻译后修饰,如糖基化和二硫键连接等
  稳定细胞株的以上内容还是比较实用的,如果还想要了解更多内容,就先关注好,今后小编会分享更多的相关信息。
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